檢測前準備工作：

1. 請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，屬于正常現象；放置室溫，輕搖均勻，待結晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3.20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

常見樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：收集血液樣本應避免溶血，因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質，這種情況下，ELISA實驗中將會出現非特異性顯色反應，導致檢測結果不準確，出現假陽性結果。另外，樣本還應避免細菌污染，因為細菌可能含有內源性HRP，也會導致檢測結果不準確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

【細胞培養物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

大鼠乳酸(LA)科研ELISA試劑盒 定量檢測組成：（檢測范圍請參考說明書）

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大鼠乳酸(LA)科研ELISA試劑盒 定量檢測操作步驟:

【試劑盒平衡至室溫】：從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

【標準品加樣】：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

【加樣】：樣本孔先加待測樣本 10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體 100μL

【溫育】：用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

【洗滌】：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5 次（也可用洗板機洗板）。

【顯色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【終止、測定】：每孔加入終止液 50μL，15min 內，在450nm波長處測定各孔的OD 值。

常見問題解答：

1.     問：試劑盒的加樣量是多少?

上海軒澤康生物解答：加樣量10ul。先加40ul稀釋液，再加10ul樣本。

2.     問：試劑盒的檢測范圍可以調整嗎?

上海軒澤康生物解答：可以調整。不同的廠家因為用的標準品不同，設定的檢測范圍也有區別。檢測范圍設定是根據樣本不同樣本實際含量來設定的，而且這個檢測范圍盡量滿足比較低的狀態，比如血清血漿，組織勻漿，細胞樣本等。

3.     問：免費代測，寄樣需要注意什么?

上海軒澤康生物解答：凡是購買我司ELISA試劑盒，均可免費代測。寄樣要求：樣本分裝在EP管/離心管/凍存管，標好編號，干冰+泡沫箱運輸，快遞優先選擇順豐。

4.     問：樣本需要寄多少?

上海軒澤康生物解答：血清等液相樣本，根據代測指標數量、是否做重復檢測而定。比如，測3個指標，每個樣本做2次檢測，每個樣本實驗需要60ul。為防止運輸、實驗過程中損耗，可以稍微多寄5-10ul。新鮮組織樣本需要郵寄不得少于50mg的量。

5.     問：試劑盒可以分次使用嗎?

上海軒澤康生物解答：我司酶標板均可以拆開使用。未用完的試劑、試劑盒，密封保存于2-8℃冷藏。有效期6個月。

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