摘要：磷酸果糖激酶(PFK)是一種激酶，在糖酵解過(guò)程中使6-磷酸果糖磷酸化。它屬于磷酸果糖激酶B（PfkB）家族。PfkB/RK家族的成員通過(guò)存在三個(gè)保守的序列圖案來(lái)識(shí)別。幾個(gè)PfK家族蛋白的結(jié)構(gòu)已經(jīng)從一些生物體中確定，這個(gè)家族蛋白的酶活性顯示出對(duì)五價(jià)離子存在的依賴(lài)性。它在骨骼肌（PFKM）、肝臟（PFKL）和血小板（PFKP）中都有異構(gòu)體版本，允許特定組織的表達(dá)和功能。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

需要但未提供的材料及耗材：

  1、酶標(biāo)儀

2、精密移液器及一次性吸頭

3、蒸餾水

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、500ml量筒

7、無(wú)粉一次性乳膠手套

牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件及有效期：

  1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個(gè)月。

  2、開(kāi)封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

  3、開(kāi)封后，按照建議的條件保存。（一個(gè)月內(nèi)使用完）

牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA檢測(cè)試劑盒性能：

【準(zhǔn)確性】：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

【檢測(cè)范圍】：請(qǐng)咨詢(xún)我司銷(xiāo)售人員領(lǐng)取說(shuō)明書(shū)

【靈敏度】：zui低檢測(cè)濃度小于0.1 U/mL

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)

【重復(fù)性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

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